请问硫酸铵沉淀的方法是什么?
的有关信息介绍如下:硫酸铵可能会损坏某些蛋白。加入硫酸铵晶体时应小心:局部浓度过高可能会造成不需要的蛋白沉淀。对于常规可再生的纯化过程,可以避免使用硫酸铵沉淀以利于层析。通常沉淀对于浓度低于1mg/ml的蛋白几乎无效。沉淀所需溶液:饱和硫酸铵溶液(在100ml蒸馏水中加入100g硫酸铵,搅拌溶解)。1M Tris-HCl,pH 8.0用于第一步纯化的缓冲液。方法:1,过滤(0.45μm膜)或离心样品(4°C 10000g)。2,每10倍体积的样品中加入一倍的1M Tris-HCl,pH 8.0以维持pH值。3,温和搅拌。逐滴加入硫酸铵溶液,最高至50%饱和度。搅拌1小时。4,10000g离心20min。5,去除上清,用等体积相同浓度的硫酸铵溶液(如不能溶解沉淀也不会造成进一步沉淀的溶液)洗涤重悬沉淀两次。再次离心。6,使用少量体积后面步骤所需的溶液溶解沉淀。7,硫酸铵在净化/更换缓冲液步骤中使用脱盐柱除去。